血液組織DNA提取試劑盒（DNeasy Blood & Tissue Kit）技術(shù)簡介
從動(dòng)物血液和組織、細(xì)胞、酵母、細(xì)菌或者病毒中純化總DNA
1.為各種類型樣本提供標(biāo)準(zhǔn)化的純化方法
2．即使是特殊類型起始樣本也可以獲得高產(chǎn)量DNA
3．高品質(zhì)DNA
4．經(jīng)過優(yōu)化的操作方法適合處理多種起始樣本
5．可選擇離心柱方式或96孔板高通量方式
DNeasy Blood & Tissue Kit采用基于硅膠膜技術(shù)的離心柱或96孔板方式快速方便的純化DNA。大多數(shù)樣本可直接用蛋白酶K消化處理，無需機(jī)械破碎，減少了手動(dòng)操作時(shí)間。為特殊樣本提供優(yōu)化的純化方法，獲得高重復(fù)性、高純度的DNA，用于生物研究、基因型分析和獸醫(yī)病理研究。DNA純化流程可以使用DNeasy Blood & Tissue Kit，在QIAcube全自動(dòng)核酸純化儀上自動(dòng)化進(jìn)行。
詳細(xì)信息：
性能
高效的DNeasy Blood & Tissue操作流程能夠從動(dòng)物血液和組織樣本中純化大量的總DNA。優(yōu)化的實(shí)驗(yàn)方案可確保非標(biāo)準(zhǔn)樣本的高產(chǎn)量，如動(dòng)物毛發(fā)和培養(yǎng)細(xì)胞、固定的組織，或者革蘭氏陽性和陰性細(xì)菌。獨(dú)特的在線實(shí)驗(yàn)方案參考文庫，可從酵母、昆蟲、毛發(fā)和其他類型樣本中純化DNA。
使用DNeasy Blood & Tissue Kits從動(dòng)物組織中純化的DNA產(chǎn)量
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樣本來源 |
樣本量 |
DNA（μg） |
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哺乳動(dòng)物血液 |
100 μl |
3–6 |
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鳥類血液 |
5 μl |
9–40 |
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HeLa細(xì)胞 |
2 x 106 |
15–25 |
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肝臟 |
25 mg |
10–30 |
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腦 |
25 mg |
15–30 |
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腎臟 |
25 mg |
15–30 |
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脾臟 |
10 mg |
5–30 |
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小鼠尾 |
1.2 cm（尾部） |
10–25 |
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大鼠尾 |
0.6 cm（尾部） |
20–40 |
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豬耳 |
25 mg |
10–30 |
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馬毛 |
10 根毛發(fā) |
2–4 |
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魚鰭 |
20 mg |
10–20 |
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魚卵（鯖魚） |
10 mg |
5–10 |
DNeasy Blood & Tissue Kits簡化了從多種樣本類型中純化DNA的流程，包括在生命科學(xué)、獸醫(yī)學(xué)和基因分型研究應(yīng)用中常見的動(dòng)物種類。純化得到的DNA不含PCR抑制劑，能在標(biāo)準(zhǔn)多重real-time PCR中進(jìn)行靈敏的檢測。DNeasy Blood & Tissue Kits確保了可靠的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，從轉(zhuǎn)基因小鼠的實(shí)驗(yàn)室分析到家畜的育種項(xiàng)目和種系基因分型研究?？梢杂?/span>DNeasy 96 Blood & Tissue Kit方便地?cái)U(kuò)大常規(guī)的檢測應(yīng)用的規(guī)模。
原理
DNeasy Blood & Tissue Kit適用于從不同的樣本中，包括新鮮或冷凍的動(dòng)物組織和細(xì)胞、血液或者細(xì)菌，快速純化總DNA（如，基因組、線粒體和病原體等）。
DNeasy膜整合了硅膠膜的結(jié)合特性，經(jīng)簡單顯微離心技術(shù)或者QIAGEN 96-Well-Plate Centrifugation System處理即可。在高濃度離液鹽的環(huán)境中，DNA吸附在DNeasy膜上，可以除去溶液中水合分子的水分。DNeasy Blood & Tissue操作流程中設(shè)計(jì)的緩沖液條件，旨在使DNA特異性吸附到硅膠膜上，并且優(yōu)化去除污染物和酶抑制劑。
純化過程不需要苯酚或氯仿抽提或乙醇沉淀，僅涉及少量手工步驟。這使得DNeasy Blood & Tissue Kits非常適合同時(shí)處理多個(gè)樣本。對(duì)于高通量的應(yīng)用，DNeasy 96 Blood & Tissue Kit能夠同時(shí)處理96或192個(gè)樣本。
操作流程
可靠的硅膠膜技術(shù)，利用便捷的離心柱或96孔板形式，確保了快速可重復(fù)的DNA純化，不再需要有機(jī)抽提和乙醇沉淀（參見DNeasy Mini and 96 procedures）。樣本首先用蛋白酶K裂解。調(diào)整緩沖條件，以提供最佳的DNA結(jié)合條件并將裂解物上樣到DNeasy Mini離心柱或DNeasy 96孔板上。在離心過程中，DNA選擇性地結(jié)合到DNeasy膜上，污染物通過。余下的污染物和酶抑制劑將在兩個(gè)高效的洗滌步驟中被去除。然后，用水或緩沖液將DNA洗脫，待用。
DNeasy Mini離心柱預(yù)裝在收集管中，并且單獨(dú)封存，確保方便和安全。使用DNeasy Mini離心柱的純化過程可在QIAcube全自動(dòng)核酸純化儀上自動(dòng)進(jìn)行。DNeasy 96 Blood & Tissue Kit可使用QIAGEN 96-Well-Plate Centrifugation System以96孔板形式進(jìn)行高通量處理。
應(yīng)用
DNeasy Blood & Tissue Kits提供高品質(zhì)DNA，可直接用于多種下游分析，包括：
1．生命科學(xué)研究
2．家畜育種
3．種系基因分型研究
4．獸醫(yī)病理分析研究
5．常規(guī)的應(yīng)用檢測
技術(shù)參數(shù)：
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特點(diǎn) |
參數(shù) |
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Applications |
PCR, real-time PCR, genotyping |
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Elution volume |
100–200 μl |
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Format |
96-well plate, spin column |
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Main sample type |
Blood, tissue |
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Processing |
Manual |
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Purification of total RNA, miRNA, poly A+ mRNA, DNA or protein |
DNA |
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Sample amount |
100 μl/25 mg |
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Technology |
Silica technology |
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Time per run or per prep |
20 minutes – 1 hour |
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Yield |
6 μg/30 μg |
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